http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/8901 2026-10-08T19:21:22Z http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/26578 Título: O Papel de inibidores de NADPH oxidases sobre as atividades da ferro redutase de leishmania amazonensis (LFR1) e sua possível influência na diferenciação e infectividade do parasito. Autor: Cardoso, Bárbara de Souza Resumo: A espécie Leishmania amazonensis ocorre em várias partes do Brasil e é o agente causador das leishmanioses cutâneas, transmitidas por insetos vetores flebotomíneos para hospedeiros vertebrados. Durante o ciclo de vida do parasito, há uma alternância entre as formas promastigotas, presentes no vetor, e as formas amastigotas infectivas intracelulares, que surgem da diferenciação dos promastigotas metacíclicos no hospedeiro mamífero. Recentemente, foi descrito que a enzima ferro redutase (LFR1) de L. amazonensis, quando ativada por heme, também pode atuar como uma NADPH oxidase (NOX). Esta enzima bifuncional parece estar envolvida no processo de diferenciação do parasito e pode constituir um novo alvo farmacológico. As NOXs estão envolvidas em várias patologias como câncer, doenças cardíacas e neurodegenerativas e, portanto, há uma busca intensa por fármacos que inibam a atividade dessas enzimas. Alguns desses inibidores estão disponíveis comercialmente, como o Setanaxib, GKT136901 e VAS2870. Nesse contexto, a fim de investigar o funcionamento da LFR1 como alvo para a terapia medicamentosa contra as leishmanioses, este estudo avaliou o efeito desses inibidores nas atividades da LFR1 de L. amazonensis e verificou seus efeitos na proliferação, diferenciação e infectividade dos parasitos. Além disso, o foi conduzida uma análise in silico, que avaliou o possível sítio de interação desses compostos na LFR1. Resultados preliminares usando o reagente Amplex Red® para medir a produção de H2O2 heme- dependente mostraram o Setanaxib a 15 μM, GKT136901 a 2,5 μM e o VAS2870 em concentrações tão baixas quanto 1 μM foram capazes de abolir totalmente a atividade NOX da LFR1. O efeito citotóxico desses inibidores contra formas promastigotas também foi avaliado através do teste MTT, em que somente o VAS2870 exibiu efeito tóxico, mostrando perda de 25% e 90% da viabilidade celular na presença de 10 μM do inibidor, após 24h e 72h, respectivamente. Na atividade ferro-redutásica da LFR1, medida através de método colorimétrico com o reagente K3Fe(CN)6, o promissor inibidor VAS2870 a 1 μM não mostrou efeito inibitório significativo, porém inibiu essa atividade em concentrações acima de 5 μM. A análise in silico, que visou demonstrar a possível interação entre o VAS2870 com o domínio desidrogenase da LFR1, cuja estrutura foi modelada ab initio, mostrou que esse inibidor interage covalentemente com o sítio ativo da enzima de forma estável. Em culturas axênicas que estimulam a diferenciação de promastigotas para amastigotas, o VAS2870 parece atuar inibindo esse processo em concentrações não-citotóxicas, embora não tenha exercido efeito sob a infecção de L. amazonensis em macrófagos murinos. Esses resultados sugerem que o VAS2870 pode atuar em ambas as atividades da LFR1, exercendo efeitos no ciclo de vida de L. amazonensis. Diante disso, não é descartada a necessidade de estudos mais profundos a respeito dos efeitos desses e de outros inibidores NOX na LFR1. 2025-07-11T00:00:00Z http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/26577 Título: Fortalecimento da produção de sementes orgânicas junto a produtores/as do litoral catarinense Autor: Trapp, David Augustus Resumo: Com a promulgação da Lei no 10.831/03, conhecida como “Lei dos Orgânicos”, que regulamentou a produção orgânica no Brasil, foram estabelecidas várias etapas relacionadas à produção de sementes orgânicas. Com a implementação da Portaria no 52/21, que determina o uso de sementes orgânicas em todo o processo de produção orgânica até 2026, enfrentamos atualmente o desafio mais significativo já registrado. Devido a uma série de obstáculos, atualmente é impossível para a maioria dos/as produtores/as nacionais atender à exigência da Portaria no 52/21. Há poucos fornecedores de sementes orgânicas no mercado nacional, com baixa diversidade de cultivos, qualidade inferior e irregularidade no fornecimento, o que dificulta que os/as produtores/as se comprometam com o uso exclusivo de sementes orgânicas. Adicionalmente, o processo de obtenção da certificação como produtor/a de sementes orgânicas é bastante complexo, em razão de conflitos entre diferentes legislações: a Lei dos Orgânicos e a Lei de Sementes e Mudas (Lei no 10.711/2003). O objetivo desta dissertação é, por meio de uma pesquisa-ação, colaborar com produtores/as orgânicos/as em Santa Catarina e capacitá-los/as para aprimorar a produção, colheita, processamento e armazenamento de sementes orgânicas. A pesquisa-ação foi realizada por meio de oficinas virtuais e presenciais, além de acompanhamento técnico. Trabalhou-se com agricultores/as familiares que têm o direito de produzir, guardar e trocar ou vender sementes entre si, visando ao cumprimento da Portaria no 52/21. Durante a pesquisa, cinco propriedades familiares foram acompanhadas, resultando na reprodução de 11 variedades de sementes orgânicas, apesar das limitações estruturais e financeiras. Foram realizadas sete oficinas virtuais com mais de 1.000 participantes, abordando temas-chave para a produção de sementes e mudas, com ampla receptividade e aplicação prática. Além disso, duas estufas foram instaladas em propriedades do Núcleo Serramar, com apoio do projeto Innova, fortalecendo a infraestrutura local. As quatro entrevistas com os/as participantes revelaram entusiasmo e desejo de ampliar a produção de sementes, embora persistam desafios como a escassez de tempo, a falta de assistência técnica e a ausência de estrutura adequada para o beneficiamento. A diversidade de cultivos, as condições climáticas adversas e a inexistência de políticas públicas específicas foram fatores limitantes. Ainda assim, a experiência demonstrou o potencial concreto de fortalecer a produção descentralizada de sementes orgânicas, desde que haja apoio técnico, articulação em rede, capacitação contínua e políticas públicas eficazes. Os resultados revelaram não apenas a produção de sementes, mas também mudanças concretas nas práticas agrícolas dos/as participantes, impulsionadas pelas oficinas e visitas técnicas. A experiência reforça a urgência de políticas públicas que reconheçam e valorizem os saberes e as práticas dos/as agricultores/as familiares como pilares para a construção de um sistema agroecológico justo, resiliente e soberano. 2025-06-16T00:00:00Z http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/26540 Título: Fatores de virulência e resistência antimicrobiana em Pseudomonas spp. sob uma perspectiva de saúde única Autor: Machado, Natália Pereira de Oliveira Resumo: O gênero Pseudomonas spp. abrange bactérias Gram-negativas, ubíquas, reconhecidas por sua alta plasticidade genética e por acumular genes inerentes e/ou adquiridos associados à virulência e à resistência antimicrobiana (RAM), os quais são essenciais para sua colonização e persistência em diferentes ambientes, como o solo, água, animais e seres humanos. A circulação dessas bactérias entre diferentes nichos ecológicos favorece a disseminação da resistência por transferência horizontal de genes (THG) que, por consequência, torna esse gênero um excelente modelo de estudos de adaptação microbiana e RAM em diferentes nichos ambientais e humanos. Dessa forma, para o Capítulo I, foram selecionadas 53 cepas de Pseudomonas spp., dentre as quais 38 foram isoladas de solos agrícolas e 2 de mata nativa em São José do Vale do Rio Preto, Rio de Janeiro, 13 foram oriundas de solos salinos de Guaratiba, região dos Lagos/RJ. Dentre as cepas analisadas, 89% dessas bactérias apresentaram pelo menos um fator de virulência, com predominância das atividades lipolítica (47%), proteolítica (45%) e hemolítica (32%). Em relação a resistência a antimicrobianos, 53% apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, com destaque para aztreonam (36%), ciprofloxacino (23%) e meropenem (19%), sendo observada multirresistência em cepas de solos agrícolas. A resistência à colistina foi confirmada em 19% das cepas. Foi verificado que as dez cepas positivas para resistência a colistina nos testes COL-AS e COL-DT mostraram concordância categórica de 100% (10/10) com o teste de microdiluição em caldo. Três cepas (SI276, SI277, SI283) apresentação concentração inibitória mínima (CIM) maior que 512 mg/L, ultrapassando o limite de detecção do método e superando em mais de 100 vezes o ponto de corte clínico (>4mg/L). No Capítulo II, foi realizada uma análise in silico com 1955 genomas de Pseudomonas spp. provenientes de origens humana, animal, solo e água. Os genomas de origem humana e animal apresentaram maior abundância e diversidade de genes de resistência antimicrobiana e fatores de virulência quando comparados aos de origem ambiental. Foram identificados 249 genes de virulência distintos, sendo fliG e flgG os mais prevalentes (99,4%), enquanto os genes de resistência adquirida mais frequentes foram vanW (67%), blaOXA (64%) e aph(3') (63,5%). Foi observada correlação positiva significativa entre o número de genes de resistência e fatores de virulência (ρ = 0,67; p = 3,45 × 10−254). Em conjunto, os resultados demonstram que Pseudomonas spp. presentes em diferentes ambientes constituem importantes reservatórios de genes de resistência antimicrobiana e fatores de virulência. Dessa forma, de acordo com os dados fenotípicos e da análise in silico, os ambientes naturais e antropizados podem atuar como fontes de manutenção e disseminação desses mecanismos de defesa bacteriano. Portanto, faz-se necessário uma vigilância contínua e abordagens integradas baseadas no conceito One Health para o monitoramento e controle da circulação de microrganismos patogênicos e da resistência antimicrobiana 2026-06-30T00:00:00Z http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/26535 Título: Aspectos clínicos da infecção natural por Dirofilaria immitis em cães atendidos no Serviço de Cardiologia e Doenças Respiratórias do Setor de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro Autor: Lemos, Nathália Marques de Oliveira Resumo: A dirofilariose canina é uma das principais afecções cardiorrespiratórias parasitárias cujo agente etiológico é o filarídeo Dirofilaria immitis (Leidy, 1856), associado ao seu endossimbionte Wolbachia sp. Muitos cães infectados são assintomáticos, sendo a suspeita clínica muitas vezes elaborada mediante o exame clínico minucioso ou pelo achado casual de microfilárias em exames laboratoriais. Animais sintomáticos apresentam manifestações clínicas inespecíficas, o que dificulta os médicos veterinários a suspeitarem da infecção e a incluírem- na no diagnóstico diferencial. Sendo assim, objetivou-se analisar os aspectos clínicos, descrevendo as alterações cardiorrespiratórias de cães, com mais de 12 meses de idade, apresentados ao Serviço de Cardiologia e Doenças Respiratporias (SCDR) do Hospital Veterinário de Pequenos Animais (HVPA) da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ). Após o consentimento formal dos tutores 26 cães foram submetidos a exame clínico (histórico, anamnese e exame físico), laboratorial (hemograma, pesquisa de microfilária e antígeno), radiográfico (radiografia torácica) e ecodopplercardiográfico. A maioria dos cães incluídos, parasitados (11/26) ou não (15/26), apresentava tosse (65,4%) e alteração na ausculta pulmonar (81%). O sopro em foco tricúspide foi observado em sete cães (26,9%), quatro deles infectados (57,1%) e três livres da infecção (42,9%). Ao ecodopplercardiograma observou-se insuficiência tricúspide em oito cães (30,8%), três deles infectados (37,5%) e, insuficiência pulmonar em 12 (46,1%), sendo seis infectados (50%). A maioria dos animais apresentava alteração no padrão pulmonar (88,5%) à radiografia torácica. O padrão bronquial foi identificado em 45,5% dos cães infectados e em 46,7% nos cães não infectados. Já o padrão intersticial foi identificado em 18,2% dos infectados e em 6,7% dos livres da infecção. Nenhum animal apresentava conjunto de alterações que denotasse probabilidade de hipertensão pulmonar, embora tenham sido observados parâmetros que indiquem que tenha ocorrido aumento da pressão pulmonar. Helmintos foram visualizados ao ecodopplercardiograma em 45,5% das infecções. Os valores hematológicos dos cães infectados e dos não infectados foram semelhantes, apresentando valores médios dentro da faixa de referência para a espécie. As avaliações realizadas demonstraram que os animais estudados não apresentavam doença grave, sendo infectados ou não. Como a dirofilariose é uma doença cardiorrespiratória que apresenta características clínicas indiferenciáveis de afecções cardiorrespiratórias por outras etiologias, fez-se necessário realizar exames parasitológicos, fossem eles pesquisa de microfilárias ou e de antígenos específicos ou até a visualização dos parasitos pelo ecodopplercardiograma, apesar de sua baixa sensibilidade. Conclui-se que a tosse foi o sinal clínico mais referido pelos tutores e, em todos os casos, confirmado pelos médicos veterinários durante o exame físico. A maioria dos animais apresentava sopro em foco tricúspide, ausculta pulmonar alterada, insuficiência da valva tricúspide e pulmonar e parênquima pulmonar com padrões bronquial ou intersticial. 2021-05-11T00:00:00Z