Seleção e identificação de bactérias halofílicas e halotolerantes solubilizadoras de fosfato

Abstract

A salinização afeta gravemente a produção agrícola em todo o mundo. Esse processo ocorre naturalmente, mas é bastante agravado e acelerado por ações antrópicas. Outra questão que limita a produção agrícola é a baixa disponibilidade de fósforo para as plantas no solo. Isso ocorre devido à alta afinidade do fósforo solúvel a outros elementos presentes no solo, o que reduz a eficiência de fertilizantes fosfatados. A rizosfera de plantas halófitas abriga diversos microrganismos que contribuem para o estabelecimento desses vegetais sob estresse salino, reduzindo os efeitos deletérios da salinidade e através de atributos de promoção de crescimento vegetal. A utilização de inoculantes de bactérias solubilizadoras de fosfato tem sido considerada uma abordagem promissora para o estabelecimento e incremento da produção de culturas sob condições de deficiência nutricional e/ou outros estresses ambientais como a salinidade do solo. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi identificar 47 isolados bacterianos, previamente isolados da rizosfera de plantas halófitas, pelo sequenciamento do gene 16S rDNA, avaliá-los quanto ao desenvolvimento em concentrações crescentes de NaCl, classificá-los quanto a resposta a salinidade e avaliar a atividade de solubilização de fosfato. A capacidade de solubilização de fosfato foi avaliada utilizando os fosfatos minerais fosfato de cálcio dibásico (CaHPO4) e fosfato de alumínio (AlPO4) em meios de cultura sólido e líquido. Os gêneros identificados foram Bacillus sp., Citrobacter sp., Enterobacter sp., Halobacillus sp., Halomonas sp., Kushneria sp., Pantoea sp., Pseudomonas sp., Oceanobacillus sp. e Staphylococcus sp., sendo os mais abundantes entre os isolados os gêneros Enterobacter sp, Pseudomonas sp. e Bacillus sp. Não foi possível identificar o isolado 145, que apresentou maior identidade com sequências de bactérias não cultiváveis depositadas no NCBI. Quinze isolados, dos gêneros Bacillus sp., Enterobacter sp., Halobacillus sp., Halomonas sp., Pantoea so., Pseudomonas sp. e Staphylococcus sp., foram classificados com halofílicos e 32 isolados dos gêneros Bacillus sp. Enterobacter sp., Halomonas sp., Kushneria sp., Pseudomonas sp., Oceanobacillus sp. e Staphylococcus sp. foram classificadas como halotolerantes. Todos isolados apresentaram desenvolvimento de colônias em meio sólido contendo ambas as fontes de fosfato, porém três deles não apresentaram halo de solubilização no meio com fosfato de cálcio. Não foi observado halo no meio contendo fosfato de alumínio. Os isolados que apresentaram a maior capacidade de solubilização de fósforo a partir do fosfato de cálcio em meio líquido foram Kushneria sp. (102), Enterobacter sp. (186), o isolado 145 e Bacillus sp. (120), com 989,53 mg/L, 956,37 mg/L, 783, 82 mg/L e 757,60 mg/L, respectivamente. Para a solubilização do fosfato de alumínio os isolados que apresentaram os maiores resultados foram Bacillus sp. (89), Oceanobacillus sp. (94), que disponibilizaram 61,10 mg/L e 45,82 mg/L P no meio. Os isolados Pantoea sp. (150) e Pseudomonas sp. (183) apresentaram atividade de solubilização considerável para o fosfato de cálcio e alumínio, 436,04 mg/L e 23,89 mg/L respectivamente para o primeiro e 376,49 mg/L e 21,28 mg/L para o segundo. Os resultados confirmam que a rizosfera de plantas halófitas abriga bactérias de diversos táxons com capacidade de crescer em concentrações elevadas de sal e promover a solubilização de fosfato.