Imunoperoxidase e métodos moleculares na detecção de Mycoplasma spp. (Mollicutes: Mycoplasmataceae) em conduto auditivo de bovinos e em Raillietia spp. (Gamasida:Raillietidae)

Abstract

Mycoplasmas são os menores e mais fastidiosos procariotos conhecidos, sendo responsáveis por altas perdas econômicas relacionadas a produtividade em ruminantes. Micoplasmas tem sido encontrados com frequência em conduto auditivo de caprinos. Nestes casos, estão estreitamente relacionados com ácaros Psoroptidae e Raillietidae, que carreiam e disseminam micoplasmas entre os rebanhos. No Brasil, estudos sobre Mycoplasma em conduto auditivo de bovinos inexistem. Assim, no Capítulo I, foram levantados dados sobre prevalência de micoplasmas presentes no conduto auditivo de bovinos e sua associação com ácaros Raillietia spp., além da identificação das duas espécies de Raillietia spp. parasitas de conduto auditivo de bovinos da região sudeste do Estado do Rio de Janeiro. A prevalência de Mycoplasma spp. no conduto auditivo de bovinos foi considerada alta, 80% (48/60). A prevalência de Raillietia spp. foi de 76,7% (46/60). Em 40 (74,1%) animais verificou-se parasitismo por Raillietia spp. e Mycoplasma spp., esta associação foi altamente significativa (p<0,001). Das fêmeas de Raillietia identificadas 52,3% (101/193) foram R. auris e 47,7% (92/193) foram R. flechtmanni. comprovou-se que micoplasmas e ácaros do conduto auditivo de bovinos estão estreitamente relacionados e que neste sítio de localização estão presentes Mycoplasmas com alto potencial patogênico para bovinos. No Capítulo II, foi realizada tipificação molecular dos isolados de Mycoplasma pertencentes ao Grupo Mycoplasma mycoides (GMM) através da técnica de PCR-REA, sendo estes resultados comparados com os obtidos na técnica de imunoperoxidase indireta (IPI). A prevalência obtida para o GMM na IPI foi de 20,0% (12/60) enquanto na PCR-REA foi de 41,7% (25/60). Das espécies de Mycoplasma tipificadas pela IPI 58,3% (7/12) foram M. mycoides subsp. mycoides LC e 41,7% (5/12) foram M. capricolum. Na PCR-REA, GMM, foi confirmado pela visualização de um amplicon de 785bp, compatível com este grupo. Na clivagem do produto da PCR com a enzima de restrição AluI, os fragmentos obtidos foram compatíveis com cepas padrão do GMM, e dos isolados de conduto auditivo de bovinos estudados, nenhum fragmento de 370pb compatível com MmmSC, biotipo bovino foi encontrado.