Identificação e quantificação de hemócitos de fêmeas ingurgitadas de Boophilus microplus inoculados com fungos Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Penicillium corylophilum e Fusarium oxysporum

Abstract

O controle biológico do carrapato Boophilus microplus com a utilização de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana tem sido avaliado por diversos pesquisadores. A seleção de cepas resistentes é um mecanismo adotado pelos artrópodes para sobrevivência da espécie e sua manutenção no ambiente. Apesar de estar esclarecida a forma como o fungo penetra no hospedeiro e comprovada sua patogenicidade sobre diferentes fases de seu ciclo biológico, a sua resposta imune frente a estes agentes agressores necessita de maiores estudos. O presente trabalho teve como objetivo: identificar e quantificar os tipos celulares envolvidos na resposta imune celular de B. microplus inoculados com fungos entomopatogênicos não entomopatogênicos. Na experimentação foram utilizados 60 fêmeas ingurgitadas de Boophilus microplus, representando seis tratamentos cada um contendo 10 espécimes. Para os grupos inoculados com fungos entomopatogênicos foi utilizada a suspensão aquosa dos fungos Metarhizium anisopliae (isolado Ma 959) e Beauveria bassiana (isolado Bb 986). Nos tratamentos com fungos não entomopatogênicos, Penicillium corylophilum e Fusarium oxysporum, foram formados ainda um grupo testemunha (não recebeu inoculação) e um grupo inoculado com solução de tween 80 a 0,1% em água destilada estéril, considerado controle negativo. Nos grupos dos tratamentos com suspensão fúngica ou solução a inoculação foi feita na região posterior do idiossoma do carrapato. As coletas de hemolinfa foram realizadas durante todo o período de vida dos espécimes, tendo inicio 24 horas após inoculação. As amostras de hemolinfa foram fixadas com metanol e coradas com Giemsa. Em todos os períodos estudados, tanto nos espécimes inoculados com fungos como nos controles, foram observados pró-hemócitos, plasmatócitos, granulócitos, esferulócitos e oenocitóides. Pró-hemócitos, plasmatócitos e esferulócitos foram às células mais numerosas na hemolinfa. Foi observada a ausência de hemócitos no grupo inoculado com B. bassiana 72 horas após a inoculação, como também a morte dos espécimes inoculados com fungos entomopatogênicos a partir deste período. A ausência de células evidência o efeito imunossupressor do fungo sobre os carrapatos estudados. Característica não observada para Metarhizium anisopliae, mesmo tendo provocado acentuada mortalidade dos carrapatos. Os fungos não entomopatogênicos não afetaram de forma significativa o ciclo de vida destes carrapatos, sendo rapidamente eliminados do organismo.