Caracterização funcional do transportador de amônio OsAMT1.3 e seu efeito sobre a nutrição nitrogenada em plantas de arroz

Abstract

Este trabalho teve por objetivo identificar a contribuição do transportador OsAMT1.3 para o sistema de alta afinidade de absorção de amônio e caracterizar o seu papel nos mecanismos de adaptação de plantas a ambientes com baixa disponibilidade de nitrogênio. O gene OsAMT1.3 foi superexpresso em plantas de arroz da variedade Nipponbare e sua localização tecido-específica também foi determinada. Foram realizados três experimentos com o objetivo de identificar os locais de atuação do OsAMT1.3 em plantas sob privação de N e quantificar o nível de atividade do promotor gênico. A atividade do promotor do OsAMT1.3 foi fortemente induzida na ausência de N e ocorreu, principalmente, nas regiões de emissão de raízes laterais, pontas de raízes e na exoderme. Em outros dois experimentos foram determinados os parâmetros cinéticos Vmáx e KM, sob condições de alto e baixo suprimento de N-NH4+, e analisado o perfil de expressão dos transportadores de NH4+ (AMT1.1~1.3) e atividade da Glutamina Sintetase (GS) em duas linhagens transformadas (L#2 e L#8) comparadas com a tipo selvagem (WT). As linhagens transformadas apresentaram menor massa fresca quando submetidas a altas concentrações de amônio (2,0 mM), o que pode ser reflexo de uma maior taxa de absorção de amônio por essas plantas. A L#8 apresentou menor valor de KM no tratamento de 0,2 mM N-NH4+ em solução. Estes resultados sugerem uma maior eficiência de absorção de amônio que pode ter sido proporcionada pela superexpressão do transportador OsAMT1.3.