Avaliação do potencial microbicida dos compostos 1,8-cineol, alfa-pineno e p-cimeno presentes em óleos essenciais do gênero Protium sobre Leishmania amazonensis in vitro

Abstract

As leishmanioses se encontram entre as mais importantes no grupo das doenças negligenciadas. Segundo dados da OMS, o número de casos pode chegar a 1,3 milhão anualmente. As manifestações clínicas destas doenças, afligem humanos e animais, sendo um problema de saúde pública e veterinária. Os fármacos utilizados no tratamento possuem vários problemas como administração dificultosa, alta toxicidade, custo elevado e além disso, casos de resistência tem sido reportados. Os óleos essenciais são metabólitos secundários produzidos pelas plantas constituídos por uma complexa mistura de diferentes substâncias. Neste trabalho estudamos o potencial microbicida dos compostos 1,8-cineol, p-cimeno e αpineno presentes em óleos essencias do gênero Protium sobre o parasito Leishmania amazonensis um dos agentes etiológicos da leishmaniose cutânea e difusa cutânea no Novo Mundo, in vitro. Nossos dados mostraram que o tratamento com os compostos 1,8-cineol, αpineno e p-cimeno dos macrófagos murinos infectados com formas promastigotas de L. amazonensis possui atividade anti-amastigota. Os compostos inibiram a sobrevivência dos amastigotas de forma concentração dependente, com IC50 de 40 μg/mL, 50,1 μg/mL e 41,4 μg/mL para α-pineno, p-cimeno e 1,8-cineol, respectivamente. A avaliação da citotoxicidade para os macrófagos murinos foi avaliada por XTT e os resultados mostraram que as células permaneceram viáveis entre 70-95 % até a concentração mais alta testada (200μg/mL), assim como sua capacidade fagocítica não foi alterada pelo tratamento. A produção de óxido nítrico por macrófagos foi analisada por ser uma molécula altamente tóxica para microorganimos intracelulares, no entanto, o tratamento de macrófagos estimulados ou não com LPS, mostrou que estes compostos não modulam a produção de NO pelos macrófagos. Outro possível mecanismo de ação avaliado foi o efeito na composição lipídica dos parasitos tratados, nossos resultados mostraram que promastigotas de L. amazonensis apresentaram uma mudança no perfil lipídico após 48h de tratamento na concentração de 50 µg/mL dos compostos. O tratamento com 1,8-cineol diminuiu as concentrações de triacilglicerol e esterol + 1.2 diacilglicerol em torno de 50%, enquanto que em ácidos graxos e 1.3 diacilglicerol há uma tendência de redução nos parasitos tratados. Por outro lado, α-pineno aumentou as concentrações de triacilglicerol e esterol esterificado em 50% e p-cimeno aumentou em 26% de triacilglicerol. Os resultados indicam que os compostos α-pineno, p-cimeno e 1,8-cineol tem atividade anti-Leishmania contra Leishmania amazonensis.