Polimorfismo nos genes IGF-1 e NF1-C2 e sua associação com características produtivas em caprinos leiteiros

Abstract

Diversos processos fisiológicos e metabólicos têm a participação do fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF-1). Durante os processos de crescimento mamário e gravidez, este fator atua na ação local de hormônios esteróides, do hormônio do crescimento e da prolactina, os principais reguladores da diferenciação. Além disso, é um fator necessário para o desenvolvimento do lóbulo-alveolar da glândula mamária. O NF1-C2 é o gene que codifica o fator de transcrição nuclear 1-C2, o qual media a ação da prolactina na glândula mamária e desempenha um papel importante na ativação de vários genes específicos desta glândula, participando tanto do seu estabelecimento como na proteção contra tumores durante a proliferação. Sendo assim, objetivamos com o presente estudo avaliar se as variações encontradas nos genes IGF-1 e NF1-C2 de caprinos das raças Xinjiang e Nanjiang cashmere (IGF-1) e Xinong Saanen Guanzhong Xinjiang cashmere branca (NF1-C2) estão presentes em uma população experimental de caprinos das raças Saanen e Alpina, relacionando-as com a produção de leite, duração da lactação, contagem de células somáticas e teor de constituintes do leite (proteína, gordura, lactose e extrato seco total), e detectar marcadores moleculares que possam ser utilizados na seleção e melhoramento animal. Foi utilizado um rebanho de cabras (Capra hircus), em idade reprodutiva, composto por animais das raças Saanen e Alpina, sendo considerada uma única população, genotipadas para os polimorfismos dos genes IGF-1 e NF1-C2. O sangue coletado da circulação periférica (aproximadamente 10 mL) foi utilizado para a extração de DNA genômico através das células sanguíneas brancas e a amplificação dos fragmentos foi feita por intermédio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Os fragmentos amplificados foram avaliados pelo polimorfismo no tamanho do fragmento de restrição (PCR-RFLP), identificados por intermédio de eletroforese em gel de poliacrilamida 5%, corado com nitrato de prata. Os produtos de PCR apresentaram tamanho aproximado conforme esperado, 363 pb (IGF-1) e 233 pb (NF1-C2), com um total de 168 e 197 animais avaliados, respectivamente. No íntron 4 do gene IGF-1 o polimorfismo de base única (SNP) referente a transversão G>C na posição 5752 foi identificado por meio da endonuclease HaeIII, porém o alelo A teve uma frequência muita baixa (0,09), e não houve associação significativa com nenhuma das características produtivas avaliadas (P>0,05). Logo, seu uso como marcador para estas características não é recomendado. No gene NF1-C2, o SNP localizado no éxon 5 (G>A), na posição 44654 da sequência de nucleotídeos, foi identificado através do uso da enzima de restrição BstNI, os alelos A e G tiveram as frequências de 0,43 e 0,57, respectivamente. Foi encontrada associação deste polimorfismo com a porcentagem de proteína do leite (P<0,01), com o genótipo AA associado ao maior teor do que o GG, enquanto o genótipo heterozigoto não diferiu dos homozigotos. Assim, este polimorfismo pode auxiliar na seleção de animais que produzam um leite com maior conteúdo proteico.