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Tipo do documento: Dissertação
Título: Método bioanalítico para quantificação de Doxiciclina em plasma canino: desenvolvimento, validação e aplicação em estudos farmacocinéticos
Otros títulos: Bioanalytical method for quantification of Doxycycline in canine plasma: development, validation and application in pharmacokinetic studies
Autor: Lima, Isabela de Paula
Orientador(a): Cid, Yara Peluso
Primeiro membro da banca: Cid, Yara Peluso
Segundo membro da banca: Fonseca, Laís Bastos da
Terceiro membro da banca: Castro, Rosane Nora
Palabras clave: Doxiciclina;ELL/PBT;formulação palatável;farmacocinética;Doxycycline;LLE/LTP;palatable formulation;pharmacokinetics
Área(s) do CNPq: Química
Idioma: por
Fecha de publicación: 18-jul-2018
Editorial: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Química
Programa: Programa de Pós-Graduação em Química
Citación: LIMA, Isabela de Paula. Método bioanalítico para quantificação de Doxiciclina em plasma canino: desenvolvimento, validação e aplicação em estudos farmacocinéticos. 2018. 88 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Instituto de Química, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, 2018.
Resumen: A doxiciclina é um agente antimicrobiano da família das tetraciclinas que atua na inibição da síntese de proteínas bacterianas ligando-se, principalmente, às subunidades 30S dos ribossomos bacterianos, impedindo o acesso do aminoacetil – tRNA ao sítio receptor no complexo mRNA – ribossomo. É utilizada tanto na medicina humana quanto na veterinária. Em cães, frequentemente, é a escolha para o tratamento da Erliquiose canina. Atualmente as formas farmacêuticas existentes para doxiciclina disponíveis no mercado veterinário são comprimidos e suspensões. É uma classe bastante estudada, na literatura são encontrados com facilidade artigos que descrevem os métodos de análise para determinação dos componentes desta classe em plasma humano, entretanto em plasma canino os métodos descritos por CLAE-UV são escassos, sendo mais utilizados os métodos microbiológicos. Neste trabalho, um método foi desenvolvido e validado para a determinação da doxiciclina em plasma canino. As amostras foram submetidas a extração líquido-líquido com partição em baixa temperatura (ELL/PBT) seguida de separação por cromatografia líquida de fase reversa (CL-FR), usando como fase móvel acetonitrila/água com pH ajustado para 2,5 com ácido oxálico (20:80 v/v), o fluxo em modo isocrático com gradiente de fluxo entre 0,8-1,0 mL/min, com detecção ultravioleta (UV) a 357 nm. A oxitetraciclina foi utilizada como padrão interno (PI). A validação do método comprovou seletividade, sensibilidade, ausência de efeitos matriciais e residuais e, ainda estabilidade. A linearidade do método foi estabelecida na faixa de 0,5-10 μg/mL (r > 0,99), com limite inferior de quantificação (LIQ) em 0,5 μg/mL. Precisão intra e inter-dia apresentou valores de CV inferiores a 20 % para o LIQ e 15 % para as demais amostras de controle de qualidade e os valores de exatidão intra e inter-dia, expressos em EPR, apresentaram-se na faixa de ±20 % para o LIQ e ±15 % para as demais amostras de controle de qualidade. O método foi totalmente validado, atendendo a todos os parâmetros da legislação da ANVISA. A metodologia foi aplicada para análise de farmacocinética comparativa de doxiciclina administrada pela via oral a partir de duas formas farmacêuticas sólidas: comprimido mastigável e comprimido revestido (Doxifin), na dose de 100 mg. Ambas formulações são de uso veterinário, o comprimido mastigável foi desenvolvido previamente pelo Laboratório de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterinária (LQEPV) e o comprimido revestido foi adquirido em loja de artigos animais. A administração dessas formulações atingiram, respectivamente, a circulação sanguínea (Cmax = 1,11 e 1,16 µg/mL), sendo absorvida (tmax de 240 e 195 minutos) e eliminada (t1/2 =1106,24 ± 130,41 e 1685,919 ± 726,44 minutos) rapidamente. A similaridade nos perfis plasmáticos das duas formulações testadas foi observada e a bioequivalência foi confirmada por testes estatísticos.
Abstract: Doxycycline is an antimicrobial agent from the tetracycline family that acts inhibiting the synthesis of bacterial proteins by binding, principally, to the 30S subunits of bacterial ribosomes, preventing the access of the aminoacetyl-tRNA to the receptor site in the mRNA-ribosome complex. It is often the choice for the treatment of canine Ehrlichiosis. Currently, doxycycline is available in the veterinary market under the pharmaceutical forms: tablet and suspension. It is a class well studied, in the literature are easily found articles describing the methods of analysis for determination of the components of this class in human plasma, however, in canine plasma the methods described by HPLC-UV are scarce, having microbiological methods being more used. In this work, a method was developed and validated for the determination of doxycycline in canine plasma. The samples were submitted to liquid-liquid extraction with low temperature partitioning (LLE/LTP) followed by separation by reverse phase liquid chromatography (RP-LC), using as the mobile phase acetonitrile / water adjusted to 2.5 with oxalic acid (80:20 v/v), the gradient flow between 0.8-1.0 mL/min, with ultraviolet (UV) detection at 357 nm. Oxytetracycline was used as internal standard (IS). The validation of the method showed selectivity, sensitivity, absence of matrix and residual effects, and stability. The linearity of the method was established in the range of 0.5-10 μg/mL (r > 0.99), with lower limit of quantification (LLOQ) in 0.5 μg/mL. Intra- and inter-day accuracy presented CV values of less than 20% for LLOQ and 15% for other quality control samples and intra and inter-day accuracy values expressed in RSE, presented in the range of ±20% for LLOQ and ±15% for the other quality control samples. The method was fully validated, taking into account all the parameters of ANVISA's legislation. The methodology was applied for analysis of comparative pharmacokinetics of doxycycline administered orally from two solid dosage forms: chewable tablet and commercial tablet (Doxifin®), dose of 100 mg. Both formulations are for veterinary use, the chewable tablet was previously developed by the Laboratório de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterinária (LQEPV) and the commercial tablet was purchased from an animal store. Administration of these formulations reached, respectively, blood circulation (Cmax = 1.11 and 1.16 μg/mL), being absorbed (tmax of 240 and 195 minutes) and eliminated (t½ = 1106.24 ± 130.41 and 1685.919 ± 726.44 minutes) rapidly. The similarity in the plasma profiles of the two formulations tested was observed and bioequivalence was confirmed by statistical tests.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/17685
Aparece en las colecciones:Mestrado em Química

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