Anatomia e otimização de protocolos para extração de DNA genômico de madeira de Caryocar glabrum (Aubl.) Pers.

Abstract

O presente estudo teve como objetivo testar três diferentes tipos de protocolos de extração de DNA genômico de madeira seca da espécie Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (Piquiarana), observando também as características anatômicas desta madeira, através de lupa (aumento 10x) e microscopia eletrônica de varredura. O primeiro protocolo utilizado foi uma adaptação de Doyle e Doyle (1990), em que foi utilizado um tampão de extração na seguinte concentração, 2% p/v de CTAB, 2,5% de PVP, 2M NaCl, 100mM Tris-HCl (pH 8,0) e 40μL de β – Mercaptoetanol. O segundo protocolo testado foi o Kit DNeasy Plant Mini. E o terceiro protocolo testado foi uma adaptação de Swetha et al. (2014), onde o tampão de extração utilizado possui a concentração, 100mM Tris base, 20mM EDTA, 3M NaCl, 5% CTAB, 1% PVP e 3μL de β – Mercaptoetanol. Foi verificado que os protocolos 1 e 2 possibilitaram a extração do DNA da madeira de Caryocar glabrum (Aubl.) Pers. (Piquiarana) em quantidades consideráveis, sendo o mais adequado para extrair DNA genômico de espécies nativas tropicais, o protocolo 2, por apresentar um grau de pureza acima de 1,8.