Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9754
Tipo do documento: Tese
Título: Cultivo de Borrelia burgdorferi e B. garinii (Spirochaetales:Spirochaetaceae): cinética de crescimento em diferentes meios de cultivo e técnicas de coloração
Autor: Oliveira, Ângela de
Orientador(a): Fonseca, Adivaldo Henrique da
Primeiro membro da banca: Fonseca, Adivaldo Henrique da
Segundo membro da banca: Yoshinari , Natalino Hajime
Terceiro membro da banca: Rangel Filho, Francisco Benedito
Quarto membro da banca: Massard, Carlos Luiz
Quinto membro da banca: Inada, Tetsuo
Palabras clave: Medicina Veterinária
Área(s) do CNPq: Medicina Veterinária
Idioma: por
Fecha de publicación: 21-mar-2002
Editorial: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Veterinária
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Citación: OLIVEIRA, Ângela de. Cultivo de Borrelia burgdorferi e B. garinii (Spirochaetales:Spirochaetaceae): cinética de crescimento em diferentes meios de cultivo e técnicas de coloração. 2002. 113 f. Tese (Doutorado em Ciências Veterinárias) - Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica - RJ, 2002.
Resumen: No presente trabalho, foram utilizados 57 meios para cultivo de Borrelia burgdorferi Johnson, Schmid, Hyde, Steigerwalt & Brenner 1984, e 26 meios para cultivo de B. garinii Baranton, Postic & Saint Girons 1992. Nestes meios foram adicionadas diferentes substâncias, soros sanguíneos de diferentes espécies animais e vários pHs: 6,4; 6,5; 6,8; 7,0 e 7,5. Observou-se que as duas amostras tiveram um bom crescimento na maioria dos meios testados. Foi estudada a cinética de crescimento de B. burgdorferi e B. garinii, pelo período de 3 meses, utilizando os seguintes meios: 1) BSK adicionado de soro de coelho; 2) BSK adicionado de soro de suino; 3) BSK adicionado de soro de suino e 5 fluorouracil; 4) PMR; 5) CTB; 6) DUBOS; 7) Caldo Brucella e 8) BHI. Todos os meios foram preparados assepticamente e mantidos em tubos de ensaio com capacidade para 10 mL. Para cada meio de cultivo, o inóculo foi padronizado para conter no início, 102 espiroquetas para cada 0,1 mL de cultivo. O monitoramento do crescimento foi feito contando-se o total de espiroquetas em 0,1 mL do meio entre lâmina de microscopia com dimensões de 26 x 76 mm e lamínula com dimensões de 10 x 30 mm, tendo sido utilizado microscópio de campo escuro e aumento de 250X e 400X. A contagem foi realizada pelo período de 14 semanas, tendo sido diária nos primeiros 12 dias e semanal a partir desta data. Houve crescimento de B. burgdorferi e B. garinii, em todos meios testados, com melhor performance para BSK adicionado de soro de coelho, BSK xvi adicionado de soro de suino + 5 fluorouracil e meio CTB. Observou-se crescimento de B. burgdorferi a partir da 4ª semana atingindo o platô de crescimento entre a 8ª e 12ª semanas, quando ocorreu a exaustão do meio de cultivo. Para B. garinii, observou-se um ligeiro aumento do crescimento a partir da 6ª semana, atingindo um platô de crescimento entre a 9ª e 12ª semanas, e seguido da diminuição do mesmo. A B. burgdorferi após ser cultivada em meio de BSK, foi mantida viável em tubo nunc, adicionado de Glicerol a 80%, pelo período de 12 meses a temperatura de 0 ºC. Foi realizada, com sucesso, a coloração das duas amostras de Borrelia, utilizando os corantes cristal violeta, safranina, fucsina e verde brilhante.
Abstract: In the present study, it was used 57 media for cultivation of Borrelia burgdorferi Johnson, Schmid, Hyde, Steigerwalt & Brenner 1984, and 26 media for cultivation of Borrelia garinii Baranton, Postic & Saint Girons 1992. In these media it was added different substances, blood serum from different animal species and pH variation of 6.4; 6.5; 6.8, 7.0 and 7.5. It was observed a good growth of the two isolates on most of the tested media. It was studied the dynamic of growth of B. burgdorferi and B. garinii for a period of three months, by utilizing the following media: rabbit serum BSK; 2) swine serum BSK; 3) swine serum BSK + 5- fluorouracil; 4) PMR; 5) CTB; 6) DUBOS; 7) Brucella broth and 8) BHI. All media were prepared aseptically and they were maintained in culture tubes with capacity for 10 mL. For each culture medium, the inoculum was standardized to contain 102 spirochete initially for each 0.1 mL of culture. The monitorization of growth was done by counting the total number of spirochetes in 0.1 mL of medium, utilizing a 26 X 76 mm slide with a 10 x 30 mm cover slip, in a dark field microscope with xviii magnication of 250X or 400X. On the first 12 days counting was done at each 24 hours and after that, once per week, for a period of 14 weeks. There was growth of B. burgdorferi and B. garinii, in all tested medium, with the best performance for BSK with rabbit serum, BSK swine serum + 5 fluorouracil and CTB medium. Growth of B. burgdorferi was observed starting by the 4th week, reaching maximum growth by the 8 th week and 12th week, depleting the culture medium after this time. For B. garinii, it was observed a slight increase in growth at the 6 th week, and a maximum growth between the 9 th and 12 th weeks, and after that, there was reduction of growth. The B. burgdorferi after being cultured in BSK medium, was maintained viable in cryogenic vials with addition of 80% glycerol, for the period of 12 months at 0 ºC. The staining of two isolates of Borrelia was done, with success, by using crystal violet, safranin, fucsin and brilhant green.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9754
Aparece en las colecciones:Doutorado em Ciências Veterinárias

Se for cadastrado no RIMA, poderá receber informações por email.
Se ainda não tem uma conta, cadastre-se aqui!

Ficheros en este ítem:
Fichero Descripción TamañoFormato 
2002 - Angela de Oliveira.pdfAngela de Oliveira1.38 MBAdobe PDFVista previa
Visualizar/Abrir


Los ítems de DSpace están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.