Cryptosporidium em bezerros destinados à exploração leiteira no Estado do Rio de Janeiro: padronização de técnicas moleculares, caracterização genotípica e influência do manejo na infecção

Abstract

A criptosporidiose bovina é de grande relevância para a pecuária brasileira, principalmente em animais jovens. Bovinos infectados com Cryptosporidium podem apresentar um baixo desempenho produtivo além de eliminar grande quantidade de formas infectantes no ambiente, especialmente aqueles que apresentam um quadro clínico de diarréia. Os objetivos do trabalho foram: comparar duas técnicas de extração de DNA utilizando um kit comercial e um protocolo adaptado por pesquisadores; analisar diversas temperaturas de anelamento para as reações de PCR-Nested para os genes alvo 18S e GP60, além de dois tipos de coloração de fragmentos de DNA em gel de agarose (brometo de etídio e gelred); determinar a ocorrência de espécies e subtipos de Cryptosporidium em bezerros com até um ano de idade, através da técnica de PCR para os genes alvos 18S e GP60 e analisar a influencia de modificações no manejo no percentual de infecção em bezerros. Os resultados da padronização demostraram uma maior grau de pureza do kit comercial, tendo sido ainda estabelecido novas temperaturas para uma otimização das técnicas, além da maior sensibilidade e baixa toxicidade do corante gelred. Após o sequenciamento foi observada a presença de três espécies de Cryptosporidium infectando bezerros em diferentes faixas etárias. Na fase pré-desmame (< 2 meses) 10% dos animais encontravam-se infectados por C. parvum, enquanto que os bezerros na fase pósdesmame (≥ 2 meses) apresentaram-se infectados por C. andersoni (15%) e C. ryanae (2%). Nesse estudo também foi observado que a implantação de algumas mudanças no manejo da propriedade pode ser de grande ajuda na tentativa de diminuir a disseminação da doença entre os animais e reduzir a contaminação ambiental.