Diterpenóides ent-caurenos isolados da geoprópolis de abelha sem ferrão mandaçaia (Melipona quadrifasciata anthidioides) e o potencial antifúngico

Abstract

No Brasil há uma variedade de espécies de abelhas sem ferrão (meliponíneos), pertencentes à família Apidade. A abelha Melipona quadrifasciata anthidioides, conhecida popularmente como mandaçaia, é capaz de produzir a geoprópolis, uma substância resinosa de matriz complexa, constituída por uma mistura de barro e/ou argila com os exsudatos das plantas. Diversas atividades biológicas da geoprópolis são descritas, como antibacteriana, antiviral, antioxidante e antifúngica. A esporotricose é uma infecção causada pelo fungo do gênero Sporothrix, sendo uma zoonose, que no Brasil é endêmica e transmitida pelo fungo Sporothrix brasilliensis. As opções de tratamento, como o Itraconazol, vêm sendo dificultado pelo surgimento de novos isolados fúngicos com resistência aos medicamentos. Sendo assim, a busca de novas substâncias que possam ser usadas no tratamento da esporotricose é de interesse científico. Este trabalho teve como objetivo, avaliar o perfil químico, o teor de fenólicos e flavonoides totais, a capacidade antioxidante, isolar e caracterizar substâncias da geoprópolis de abelha Melipona q. anthidioides (mandaçaia), além de investigar a atividade antifúngica in vitro contra isolados clínicos de S. brasiliensis. A geoprópolis foi coletada no Bosque da Barra, Rio de Janeiro, e o extrato etanólico de geoprópolis de mandaçaia (EEGP-M) foi preparado em banho ultrassônico por duas horas. Posteriormente o extrato etanólico foi solubilizado em metanol: água (7:3 v/v) e particionado com hexano e diclorometano, respectivamente, gerando as frações: Fr. Hex, Fr. DCM e Fr. MeOH:H2O. A Fr. Hex foi submetida a cromatografia em coluna aberta em gel de sílica, onde isolou-se três diterpenos de esqueleto ent-caureno, o diterpeno ácido caurenóico, um derivado de ácido cinâmico, o ácido caur-16-en-18-óico, 15-[(1-oxo-3-fenil-2-propen-1-il) oxi], e o diterpeno o ent-caurenal, caracterizado de uma fração enriquecida. O conteúdo total de fenólicos e flavonoides foi avaliado em comparação aos padrões de ácido gálico (GA) e quercetina (QE), respectivamente. A Fr. DCM obteve os melhores resultados, com 1,89 mg EAG/100mg em fenólicos e 0,42 EQE/100mg em flavonoides. O ensaio DPPH foi utilizado para determinar a capacidade antioxidante do extrato e suas frações, novamente a fração Fr. DCM apresentou melhor resultado (CE50= 200 µg/mL), corroborando com o resultado de fenóis e flavonoides totais. A atividade antifúngica foi investigada contra cepas clínicas de S. brasiliensis. O melhor resultado foi observado para o derivado do ácido cinâmico isolado (CIM =0,469 mM), entretanto o ácido caurenóico (CIM = 1,875 mM) e a fração enriquecida com o aldeído ent- caurenal (0,187 mg/mL) também apresentaram bons resultados; dentre o extrato etanólico e suas frações, a Fr. Hex apresentou melhor resposta antifúngica (CIM= 0,281 mg/mL). O teste de atividade antifúngica demonstrou o potencial de inibição do extrato etanólico, suas frações e das substâncias isoladas da geoprópolis de mandaçaia contra S. brasilliensis, sinalizando que este produto natural é promissor para o tratamento da esporotricose.