Estudos bioquímicos comparativos dos ovos de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) durante a oviposição

Abstract

Objetivando preencher algumas lacunas sobre os mecanismos intrínsecos da biologia da oviposição de R. (B.) microplus, foram avaliadas as concentrações de lipídios e carboidratos, assim como a variabilidade lipídica dos ovos postos em diferentes dias de postura. Para isso, fêmeas ingurgitadas pesando entre 151 e 360 mg foram colocadas em estufa biológica sob condições controladas (27 ± 1oC, 80 ± 5% UR, escotofase), e após início da postura, três amostras diárias do “pool” de ovos foram coletadas, acondicionadas e preservadas a –20ºC. As amostras 1 e 2, pesando 50 mg cada, foram utilizadas para dosar lipídios e glicose, e avaliar o perfil de lipídios, respectivamente; a amostra 3, contendo 1 g de ovos foi utilizada para dosar glicogênio. A dosagem de lipídios totais foi realizada através do reagente de fosfo-vanilina, enquanto as concentrações de colesterol, triglicerídios e glicose foram obtidas através de determinação colorimétrica com a utilização de kit enzimático de ponto final. A dosagem de glicogênio foi realizada através do reativo ácido 3,5 dinitrosalicílico. Os resultados das dosagens foram analisados pelo teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e a relação entre as concentrações dos substratos e os dias de postura foi avaliada através de Regressão polinomial. Não foram constatadas diferenças significativas entre as concentrações destes substratos nos ovos de diferentes dias de oviposição, assim como não houve relação dessas concentrações com os dias de postura. Após extração dos lipídios das amostras, foram realizadas cromatografias em camada delgada de alto desempenho (HPTLC) para lipídios neutros e fosfolipídios. Em seguida, a densitometria foi realizada através do programa Image Master Total Lab e o percentual diário de cada lipídio nas amostras foi calculado. Dentre os lipídios neutros foram identificados hidrocarbonetos, colesterol esterificado, triglicerídios, ácidos graxos, colesterol livre e diacilglicerol. Destes, o colesterol esterificado foi o que apresentou maior variação, não sendo detectado nos ovos do quinto dia de oviposição. Dentre os fosfolipídios foram detectados o ácido fosfatídico, fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina, fosfatidilinusitol e esfingomielina. Sendo este último ausente nos ovos do sétimo dia de postura em diante. Assim, as diferentes taxas de eclodibilidade por dia de postura não podem ser atribuídas às concentrações de lipídios totais, embora alguns lipídios específicos como o colesterol esterificado e a esfingomielina possam ter influência na diferença de eclodibilidade larval, sendo necessários mais estudos para eclarecer o papel desses substratos na embriogênese