Ehrlichia bovis (Donatien & Lestoquard, 1936) - Diagnóstico, cultivo "in vitro" e aspectos epidemiológicos em bovinos no Brasil

Abstract

O agente etiológico da ehrlichiose bovina, Ehrlichia bovis (Donatien & Lestoquard, 1936), causador da doença também conhecida como "Nopi", "Nofel" ou Mal da orelha no continente africano, é assinalado pela primeira vez em bovinos do Brasil, nos Estados do Rio de Janeiro e Minas Gerais. A riquetsia em questão foi diagnosticada em células mononucleares de esfrega- ços sangüíneos e impressões de orgãos de bovinos, determinando baixas parasitemias mesmo durante a fase febril da doença quando estudada experimentalmente. O levantamento realizado para identificação dos hemoparasitos, em 296 bovinos com até 1 ano de idade, procedentes de 12 municípios, examinados através esfregaços sangüíneos corados pelo Giemsa, determinou a prevalência de E. bovis em 9,8%; ocorrendo em infecções simples ou mistas com Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis. A esplenectomia de bovinos exacerbou infecções inaparentes por E. bovis, B. bigemina, B. bovis, A. marginale, Eperythrozoon wenyoni e Eperythrozoon teganodes. Leucócitos obtidos a partir de sangue bovino desfibrinado, cultivados "in vitro" em tubos de Leighton com lamínulas, incubados à temperatura de 37°C, permitiram evidenciar a multiplicação de E. bovis no citoplasma de leucócitos. A viabilidade infectiva dos microrganismos provenientes do cultivo "in vitro" foi comprovada pela infecção experimental em bovinos inoculados com estas amostras. Os antígenos particulados de E. bovis obtidos a partir de cultivos celulares, e inoculados em coelho induziram a produção de soro imune específico, o qual após conjugação com isotiocianato de fluoresceína, permitiu sua utilização no diagnóstico da E. bovis pelo teste de imunofluorescência direta (IFD). O teste de imunofluorescência direta demonstrou ser metodologicamente mais eficiente e de rápida execução, quando comparado com o método convencional de coloração pelo Giemsa. Ovinos, cães, coelhos e caprinos foram refratários à infecção por E. bovis, quando inoculados experimentalmente com sangue ou suspensão de cultivos de leucócitos, contendo E. bovis. Infestações experimentais de bovinos com Amblyomma cajennense, determinaram que ninfas desta espécie de carrapato, quando alimentadas no estádio larval, em bovinos portadores da infecção, são capazes de transmitir E. bovis a bovinos negativos à este agente etiológico. Impressões de ninfas de A. cajennense nestas condições, quando examinadas pe- la imunofluorescência direta (IFD) resultaram positivas à E. bovis. Os sinais clínicos observados em animais portadores de E. bovis foram febre, enfartamento de linfonodos periféricos, apatia, anorexia e emagrecimento. Nos estudos hematoló- gicos foram constatados: leucocitose monocítica e linfocítica, eosinopenia, e grande quantidade de monócitos vacuolados. Estes achados permitem um diagnóstico presuntivo de ehrlichiose bovina. O diagnóstico laboratorial pode ser realizado inicialmente em esfregaços sangüíneos corados pelo Giemsa e confirmado pelo método de imunofluorescência direta. Em condições naturais E. bovis foi encontrada em bovinos nas épocas de maior intensidade populacional de carrapatos, bem como os sinais clínicos foram melhor observados em animais debilitados.