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Tipo do documento: Dissertação
Título: Avaliação da eficácia e caracterização molecular de Brevibacillus laterosporus no controle biológico de Ctenocephalides felis felis (Bouché, 1835) (Siphonaptera: Pulicidae)
Otros títulos: Evaluation of the effectiveness and molecular characterization of Brevibacillus laterosporus in biological control of Ctenocephalides felis felis (Bouche, 1835) (Siphonaptera: Pulicidae)
Autor: Gomes, Milene Barbosa
Orientador(a): Bittencourt, Vânia Rita Elias Pinheiro
Primeiro coorientador: Zahner, Viviane
Primeiro membro da banca: Moraes, Ana Maria Lage de
Segundo membro da banca: Scott, Fábio Babour
Palabras clave: Brevibacillus laterosporus;Perfil Plasmidial;Ctenocephalides felis felis;Controle Biológico;Brevibacillus laterosporus;Plasmid Profile;Ctenocephalides felis felis;Biological Control
Área(s) do CNPq: Medicina Veterinária
Idioma: por
Fecha de publicación: 27-jun-2011
Editorial: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Veterinária
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Citación: GOMES, Milene Barbosa. Avaliação da eficácia e caracterização molecular de Brevibacillus laterosporus no controle biológico de Ctenocephalides felis felis (Bouché, 1835) (Siphonaptera: Pulicidae). 2011. 97 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica - RJ, 2011.
Resumen: Este trabalho avaliou a ação patogênica de estirpes de Brevibacillus laterosporus que apresentaram potencial para outros alvos em Ctenocephalides felis felis, através de bioensaios com diferentes formulações (induto líquido e liofilizado) nos diferentes estágios de desenvolvimento bacteriano (vegetativo, esporângio e esporo livre) e também buscou-se caracterizar as estirpes por técnicas moleculares como PCR-BREV, RAPD-PCR e analisar seu perfil plasmidial utilizando PFGE e eletroforese convencional que foi determinado pela presença de plasmídeos com tamanhos diferenciados e sua correlação com a patogenicidade. Além disso, a técnica de MLEE foi aplicada e novas isoenzimas foram testadas. Os bioensaios realizados com diferentes formulações demonstraram que houve diferença significativa entre o controle e os tratamentos com as estirpes NRS1111 e NRS590 apenas nas formulações com induto líquido, contudo não houve diferença entre os estágios de desenvolvimento de Br. laterosporus. Através da PCR com o primer BREV foi possível confirmar a posição taxonômica das estirpes analisadas dentro do gênero Brevibacillus. Quando aumentamos o número de enzimas testadas pela técnica de MLEE, não foi possível separar estipes patogênicas de não patogênicas, contudo foi possível observar que Br. laterosporus é uma espécie formada por estirpes com baixo polimorfismo genético. Assim, a MLEE se apresenta como ferramenta pouco útil para a caracterização entre as estirpes de Br. laterosporus. A técnica de RAPD-PCR foi realizada com os primers OPA11, OPA02 e OPA04, sendo possível observar entre as estirpes um perfil altamente polimórfico e discriminatório. A identificação de estirpes descritas como Br. agri, foram caracterizadas como Br. laterosporus, utilizando as técnicas de MLEE e RAPD-PCR. Por diferentes técnicas de eletroforese (PFGE e Unidirecional) foi possível obter um perfil plasmidial de cada estirpe utilizada neste trabalho, contudo podemos afirmar que a patogenicidade em Br. laterosporus não está relacionada com a presença de plasmídeos.
Abstract: The current study evaluated, by bioassay, the action of pathogenic strains of Brevibacillus laterosporus that showed potential to other targets in C. felis felis. Also, this study analyzed the plasmid profile using molecular techniques: PFGE and conventional electrophoresis. These analyses determined the presence of plasmids with different sizes, and the profiles were correlated with the pathogenicity of Br. laterosporus strains. In addition, MLEE was applied and new isoenzymes were tested. Bioassays showed significant differences between the control and the groups treated with strains NRS1111 and NRS590, but no difference was observed among the developmental stages of Br. laterosporus. When the number of enzymes tested by MLEE was increased, the pathogenic strains were not separated from non-pathogenic strains; the results showed, however, that Br. laterosporus is a species formed by strains with low genetic polymorphism. In conclusion, MLEE is presented as a useful tool for characterization of strains Br. laterosporus. The RAPD-PCR technique was performed with primers OPA11, OPA02 and OPA04, and a high polymorphic profile was observed among the strains. The identification of strains described as Br. agri were designated as Br. Laterosporus by MLEE and RAPD-PCR. Using electrophoresis techniques (PFGE and Unidirectional), a plasmid profile was obtained for each strain investigated in the current study; and, therefore, this study may conclude that the pathogenicity of Br. laterosporus is not related to the presence of plasmids.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/11699
Aparece en las colecciones:Mestrado em Ciências Veterinárias

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