Imunomarcação dos componentes da matriz extracelular da membrana amniótica equina sob diferentes métodos de conservação e sua aplicação clínica

Abstract

Neste trabalho, buscou-se estabelecer e validar protocolos para coleta, preparo e preservação da membrana amniótica equina que possibilitem a obtenção de um biomaterial viável e livre de contaminação para utilização com fins terapêuticos. Foram testados e estudados os processos de preparo de três diferentes tipos de biomateriais, a membrana restituída de congelamento (AMNn), a membrana desidratada (AMNd) e a membrana descelularizada (AMNTx). Cada um desses materiais também foi caracterizado morfologicamente por imunofluorescência. Complementando o estudo, foi realizada a avaliação clínica pela utilização de cada biomaterial através do tratamento de reparo de lesões corneais em queratomalacia. O resultado do estudo dos processos de coleta, preparo e preservação, demonstrou ser eficiente para produção dos biomateriais. Os materiais AMNTx e AMNn foram os que demandaram mais recursos na sua produção e métodos de armazenamento. O biomaterial AMNd foi o que despendeu menores recursos de produção e armazenamento, demonstrando ser um material versátil capaz de ser utilizado em locais com pouca infraestrutura. Os resultados da caracterização morfológica por imunofluorescência de cada biomaterial culminaram com a comprovação da manutenção dos componentes laminina, fibronectina e dos colágenos I e IV na estrutura da maioria das amostras dos biomateriais estudados, com exceção da AMNd para colágeno I, que apresentou resultado inconclusivo. A avaliação dos tratamentos mostrou que a utilização desses biomateriais foi capaz de reduzir a formação de tecido cicatricial nas lesões. A comparação desses resultados também demonstrou que a membrana desidratada obteve o melhor desempenho clínico perante as membranas congeladas e descelurarizadas, quando observadas a quantidade de formação de tecido cicatricial, vascularização e área de córnea clara preservada. Essas informações obtidas tornam-se de suma importância, uma vez que estes biomateriais demonstraram que podem ser utilizados como bandagens curativas, servindo como arcabouço para migração, adesão, multiplicação celular, estímulo à angiogênese e controle da inflamação, durante o processo de cicatrização tecidual.