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https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9989| Tipo do documento: | Tese |
| Título: | Potencial biotecnológico da bacteriocina gluconacina recombinante de Gluconacetobacter diazotrophicus, estirpe pal5, sobre microrganismos de importância agrícola para as culturas de cana-de-açúcar e tomate |
| Título(s) alternativo(s): | ... |
| Autor(es): | Ramos, Elizabeth Teixeira de Almeida |
| Orientador(a): | Baldani, José Ivo |
| Primeiro coorientador: | Vidal, Márcia Soares |
| Primeiro membro da banca: | Baldani, José Ivo |
| Segundo membro da banca: | Carmo, Margarida Goréte Ferreira do |
| Terceiro membro da banca: | Salles, Cristiane Martins Cardoso de |
| Quarto membro da banca: | Schwab, Stefan |
| Quinto membro da banca: | Soares, Luis Henrique de Barros |
| Palavras-chave: | peptídeo antimicrobiano;controle biológico;atividade antibacteriana;antimicrobial peptide;biological control;antibacterial activity |
| Área(s) do CNPq: | Agronomia |
| Idioma: | por |
| Data do documento: | 27-Set-2018 |
| Editor: | Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro |
| Sigla da instituição: | UFRRJ |
| Departamento: | Instituto de Agronomia |
| Programa: | Programa de Pós-Graduação em Fitotecnia |
| Citação: | RAMOS, Elizabeth Teixeira de Almeida. Potencial biotecnológico da bacteriocina gluconacina recombinante de Gluconacetobacter diazotrophicus, estirpe pal5, sobre microrganismos de importância agrícola para as culturas de cana-de-açúcar e tomate. 2018. 80 f.. Tese( Doutorado em Fitotecnia) - Instituto de Agronomia - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica-RJ, 2018. |
| Resumo: | Gluconacina é uma bacteriocina produzida pela bactéria diazotrófica Gluconacetobacter diazotrophicus, estirpe PAL5. O presente estudo teve como objetivo estabelecer as melhores condições para produção heteróloga e purificação desse peptídeo antimicrobiano, e avaliar seu espectro de ação sobre fitopatógenos e bactérias benéficas de importância para as culturas de cana-de-açúcar e tomate. Foram realizadas avaliações in vitro para elucidar o mecanismo de ação dessa bacteriocina, além de verificar sua estabilidade frente à alterações físicas e químicas. O potencial biotecnológico da gluconacina foi testado in vivo em plantas de tomate na proteção contra Xanthomonas perforans, agente causal da mancha bacteriana. Os resultados demonstraram que a gluconacina recombinante foi expressa e purificada de forma satisfatória. Este agente antimicrobiano demonstrou amplo espectro de atuação, inibindo o crescimento de todos os fitopatógenos bacterianos avaliados. Em adição, a gluconacina também demonstrou antagonismo contra algumas estirpes benéficas pertencentes a espécies de Bacillus e outras estirpes de G. diazotrophicus. Células do fitopatógeno X. albilineans (microrganismo modelo) tratadas com a bacteriocina apresentaram perda de fosfato inorgânico e compostos absorventes de UV. As análises de microscopia de varredura demonstraram que as células foram totalmente lisadas após o tratamento, sugerindo que a bacteriocina gluconacina altera a integridade da membrana e aumenta sua permeabilidade, resultando em completa lise celular. Os resultados de caracterização físico-química indicaram estabilidade da atividade antibacteriana em altas temperaturas e pH’s ácidos, enquanto foi observada redução dessa atividade após o tratamento com algumas proteases e surfactantes. As avaliações em casa de vegetação demonstraram significativa redução dos sintomas da mancha bacteriana em plantas tratadas com o peptídeo antimicrobiano, sugerindo grande potencial biotecnológico. |
| Abstract: | Gluconacin is a bacteriocin produced by the diazotrophic bacterium Gluconacetobacter diazotrophicus strain PAL5. The present study aimed to establish the best conditions for heterologous production and purification of this antimicrobial peptide and to evaluate its spectrum on phytopathogens and beneficial bacteria of importance for sugarcane and tomato crops. In vitro evaluations were performed to elucidate the mechanism of action of this bacteriocin, as well as to verify its stability against physical and chemical changes. The biotechnological potential of gluconacin was tested in vivo in tomato plants the protection against Xanthomonas perforans, causal agent of the bacterial spot. The results demonstrated that recombinant gluconacin was expressed and purified satisfactorily. This antimicrobial agent demonstrated a broad spectrum of action, inhibiting growth of all bacterial phytopathogens evaluated. In addition, gluconacin has also shown antagonism against some beneficial strains belonging to species of Bacillus and other strains of G. diazotrophicus. Phytopathogen Xanthomonas albilineans cells (model microorganism) treated with bacteriocin showed loss of inorganic phosphate and UV absorbing compounds. Scanning microscopy analyzes demonstrated that the cells were fully lysed after treatment, suggesting that bacteriocin gluconacin alters the integrity of the membrane and increases its permeability, resulting in complete cell lysis. The physico-chemical characterization results indicated stability of the antibacterial activity at high temperatures and acid pH's, while a reduction of this activity was observed after treatment with some proteases and surfactants. Greenhouse evaluations showed a significant reduction of bacterial spot symptoms in plants treated with the antimicrobial peptide, suggesting a great biotechnological potential |
| URI: | https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9989 |
| Aparece nas coleções: | Doutorado em Fitotecnia |
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| Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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| 2018 - Elizabeth Teixeira de Almeida Ramos.pdf | Elizabeth Teixeira de Almeida Ramos | 3.27 MB | Adobe PDF |  Abrir |
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