Please use this identifier to cite or link to this item: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/23314
Tipo do documento: Tese
Title: Diagnóstico da otite externa em cães: comparação entre o microbioma auricular e cultura bacteriana.
Other Titles: Diagnosis of otitis externa in dogs: comparison between ear microbiome and bacterial culture.
Authors: Makita, Mário Tatsuo
Orientador(a): Souza, Miliane Moreira Soares de
Primeiro coorientador: Coelho, Irene da Silva
Primeiro membro da banca: Souza, Miliane Moreira Soares de
Segundo membro da banca: Fernandes, Julio Israel
Terceiro membro da banca: Coelho, Shana de Mattos de Oliveira
Quarto membro da banca: Melo, Dayanne Araujo de
Quinto membro da banca: Motta, Cássia Couto da
Keywords: diversidade microbiana;diagnóstico microbiológico;doença otológica;dermatologia veterinária;microbial diversity;microbiological diagnosis;otologic disease;veterinary dermatology
Área(s) do CNPq: Medicina Veterinária
Idioma: por
Issue Date: 27-Dec-2024
Publisher: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Veterinária
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Citation: MAKITA, Mário Tatsuo. Diagnóstico da otite externa em cães: comparação entre o microbioma auricular e cultura bacteriana. 2024. 94f. Tese (Doutorado em Ciências Veterinárias) - Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, 2024.
Abstract: A otite externa canina é a doença auricular mais comum em cães, afetando aproximadamente 20% da população, e ocorre quando há desequilíbrio no microambiente da orelha. O uso indiscriminado de antimicrobianos no tratamento das otites contribui para a seleção de cepas resistentes, dificultando a efetividade do tratamento. O objetivo deste estudo foi analisar a microbiota presente em cães com otite externa e compará-la com os dados obtidos nas culturas bacterianas. Foram coletadas amostras de 48 cães diagnosticados com otite externa durante consultas em clínicas particulares, totalizando 106 swabs de orelhas. As amostras foram coletadas em duplicata, com uma destinada para cultura bacteriana, inoculados em Ágar Sangue de Carneiro 5% e Ágar Eosina-Azul de Metileno, e outra para extração de DNA. Após purificação, os isolados foram identificados por métodos fenotípicos, incluindo o MALDI- TOF-MS. Ao todo, foram obtidos 125 isolados, pertencentes a 33 gêneros/espécies bacterianas, e os testes de sensibilidade aos antimicrobianos foram realizados por meio da técnica de disco- difusão. Ao total, 42 amostras atenderam aos critérios de qualidade e puderam ser sequenciadas. A análise de abundância revelou que os gêneros Staphylococcus e Corynebacterium destacaram-se nas populações otológicas. A beta-diversidade indicou uma correlação significativa entre diferentes raças, agrupando pelo menos dois grupos com comunidades microbianas similares. As 40 amostras sequenciadas permitiram a comparação dos dados com os resultados do isolamento bacteriano (55). Comparando os resultados, foi possível observar que 7,27% (4/55) dos isolados bacterianos não apareceram no sequenciamento. Em 30,91% (17/55) das amostras, a cultura foi compatível com o gênero mais abundante no microbioma, e em 61,82% (34/55) dos cultivos, o resultado da cultura não foi compatível com o microrganismo mais abundante no sequenciamento. Deste último, em 50,90% (28/55) dos casos, o sequenciamento mostrou que existiam gêneros cultiváveis mais abundantes do que aqueles encontrados na cultura. Em 29,09% (16/55) das amostras, as bactérias mais abundantes eram anaeróbias. Em metade dos casos, populações de bactérias cultiváveis mais abundantes não foram isoladas, levantando dúvidas sobre a capacidade das culturas em detectar o agente infeccioso real da otite e se são representativas para a análise terapêutica por antibiograma. Dessa forma, podemos concluir que as culturas bacterianas de otite nem sempre conseguem detectar a população bacteriana mais abundante. Além disso, os resultados indicaram evidências de que o microbioma possui uma dinâmica própria e que o tratamento pode impactar a diversidade da comunidade bacteriana.
Abstract: Canine otitis externa is the most common ear disease in dogs, affecting approximately 20% of the population, and occurs when there is an imbalance in the ear's microenvironment. The indiscriminate use of antimicrobials in the treatment of otitis contributes to the selection of resistant strains, hindering the effectiveness of treatment. The aim of this study was to analyze the microbiota present in dogs with otitis externa and compare it with the data obtained from bacterial cultures. Samples were collected from 48 dogs diagnosed with otitis externa during consultations at private clinics, totaling 106 ear swabs. The samples were collected in duplicate, with one destined for bacterial culture, inoculated on 5% Sheep's Blood Agar and Eosin- Methylene Blue Agar, and the other for DNA extraction. After purification, the isolates were identified using phenotypic methods, including MALDI-TOF-MS. A total of 125 isolates were obtained, belonging to 33 bacterial genera/species, and antimicrobial sensitivity tests were carried out using the disk-diffusion technique. In total, 42 samples met the quality criteria and could be sequenced. The abundance analysis revealed that the genera Staphylococcus and Corynebacterium stood out in the otologic populations. Beta-diversity indicated a significant correlation between different breeds, grouping at least two groups with similar microbial communities. The 40 sequenced samples made it possible to compare the data with the bacterial culture results. Comparing the results, it was possible to see that 7.27% (4) bacterial isolates did not appear in the sequencing. In 30.91% (17) of the samples, the culture was compatible with the most abundant genus in the microbiome, and in 61.82% (34) of the cultures, the culture result was not compatible with the most abundant microorganism in the sequencing. Of the latter, in 49.09% (27) of the cases, sequencing showed that there were more abundant cultivable genera than those found in the culture. In 29.09% (16) samples, the most abundant bacteria were anaerobic. In half of the cases, more abundant culturable bacterial populations were not isolated, raising doubts about the ability of cultures to detect the actual infectious agent of otitis and whether they are representative for therapeutic analysis by antibiogram. Thus, we can conclude that bacterial cultures of otitis are not always able to detect the most abundant bacterial population. In addition, the results provided evidence that microbiomes have their own dynamics, and that treatment can have an impact on the diversity of the bacterial community.
URI: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/23314
Appears in Collections:Doutorado em Ciências Veterinárias

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